鄭佩佩1946年1月6日生于中國上海，1961年離開上海到香港。1963年考入南國實驗劇團，為第二期畢業生，畢業后加入邵氏電影公司 ?。

　　1963年，在首部電影《寶蓮燈》中反串男角，飾演劉彥昌，被胡金銓看上 ?。1964年，主演文藝片《情人石》，獲得國際獨立制片人協會“金武士獎”，是第一個得到此獎的亞洲女演員 ?。

　　1966年，主演胡金銓導演的中國新派武俠電影的開山之作《大醉俠》 ?

　　1968年，主演《金燕子》飾演英姿颯爽的“金燕子”；主演電影《玉羅剎》飾演“玉羅剎”冷秋寒，1969年被報界選為“武俠影后” ?。

　　1971年，參演電影《鐘馗娘子》；同年，宣告退出影壇。

　　1992年復出；1993年，參演周星馳、鞏俐古裝喜劇電影《唐伯虎點秋香》，飾演口齒伶俐、神經兮兮的“華夫人” ?。

　　1994年3月，參演楊紫瓊、甄子丹主演的電影《詠春》，飾演嚴詠春的師父 ?。1996年，參演陳勛奇、周海媚主演的民國電視劇《上海探戈》，在劇中飾演陳勛奇的母親 ?。

　　1999年，出演張衛健、恬妞主演電視劇《少年英雄方世玉》，飾演“五梅”。

　　2001年，出演李安導演的電影《臥虎藏龍》，飾演武功陰毒詭異“碧眼狐貍”，獲得香港電影金像獎最佳女配角獎，并角逐奧斯卡金像獎 ?。

　　2004年，參演胡歌、劉亦菲主演的古裝劇《仙劍奇俠傳》，飾演“姥姥” ?；與李若彤、寧靜等主演的電視劇《楊門女將》播出，鄭佩佩在劇中出演佘太君一角 ?。

　　2005年，在古裝喜劇電視劇《李衛辭官》里飾演李衛母親 ?。

　　2010年，參演張柏芝主演古裝戰爭電影《楊門女將之軍令如山》，再次飾演佘太君 ?。

　　2013年7月，在黃曉明主演的電視劇《精忠岳飛》里飾演“岳母” ?。

　　2014年，鄭佩佩與本-維肖主演講述了中國母親在兒子死后與兒子男友故事的英國電影《輕輕搖晃》，該片獲得圣丹斯電影節“世界電影評委會劇情片攝影獎” ?。

　　2014年4月，參加由湖南衛視原創碧生源冠名的明星姐弟自助遠行真人秀節目《花兒與少年》，擔任嘉賓角色“大姐” ?

　　2015年，與斯琴高娃、陳偉霆、趙柯主演的動作電影《搏擊迷城》 ?。

　　2016年，參演胡軍主演的偶像都市話題劇《小情人》，70歲的鄭佩佩以一頭紅發造型出演“最潮奶奶”，并在劇里跳廣場舞 ?。